Амидаза (AMD)
Ферментҳо:Катализаторҳои биологии макромолекулярӣ мебошанд, аксарияти ферментҳо сафедаҳо мебошанд
Амидаза:Гидролизи амидҳои алифатикӣ ва хушбӯйҳои гуногуни эндогенӣ ва хориҷӣ тавассути интиқоли як гурӯҳи ацил ба об бо истеҳсоли кислотаҳои озод ва аммиакро катализ кунед.Кислотаҳои гидроксамикӣ ва дигар кислотаҳои органикӣ ҳамчун доруворӣ васеъ истифода мешаванд, зеро онҳо таркиби омилҳои афзоиш, антибиотикҳо ва ингибиторҳои варамҳо мебошанд.Амидазаҳоро аз рӯи стереоселективии катализатор ба ацилазаҳои навъи R ва навъи S тақсим кардан мумкин аст.
Илова ба катализ кардани гидролизи амидҳо, амидаза инчунин метавонад реаксияҳои интиқоли ацилро дар ҳузури ко-субстратҳо ба монанди гидроксиламин катализ кунад.
Амидаза бо манбаъҳои гуногун хосияти субстратҳои гуногун доранд, баъзеи онҳо танҳо амидҳои хушбӯйро гидролиз карда метавонанд, баъзеи онҳо танҳо амидҳои алифатиро гидролиз карда, баъзеи онҳо α- ё ω-амидҳоро гидролиз мекунанд.Аксари аминҳо танҳо барои амидҳои ароматии ациклӣ ё оддии хушбӯй фаъолияти хуби каталитикӣ доранд, аммо барои ароматикиҳои мураккаб амидҳои гетероциклӣ, махсусан амидҳо бо ҷойгузинҳои орто, умуман фаъолнокии паст доранд (танҳо якчанд ферментҳо таъсири каталитикии беҳтар доранд).
Механизми каталитикӣ:
Ферментҳо | Рамзи маҳсулот | Рамзи маҳсулот |
Хокаи фермент | ES-AMD-101 ~ ES-AMD-119 | маҷмӯи 19 амидаза, 50 мг ҳар як 19 адад * 50 мг / адад, ё миқдори дигар |
Маҷмӯи экран (SynKit) | ES-AMD-1900 | маҷмӯи 19 амидазаҳо, 1 мг ҳар як 19 адад * 1 мг / адад |
★ Хусусияти субстрат баланд.
★ Интихоби пурқуввати хиралӣ.
★ Самаранокии баланди табдил.
★ Махсулоти иловагй кам.
★ Шароити реаксияи ҳалим.
★ Аз ҷиҳати экологӣ тоза.
➢ Скрининги ферментҳо бояд барои субстратҳои мушаххас аз сабаби хосияти субстрат гузаронида шавад ва ферментеро гиред, ки субстрати мақсаднокро бо таъсири беҳтарини каталитикӣ катализ мекунад.
➢ Ҳеҷ гоҳ бо шароити шадид тамос нагиред, ба монанди: ҳарорати баланд, рН баланд/паст ва ҳалкунандаи органикӣ бо консентратсияи баланд.
➢ Одатан, системаи реаксия бояд субстрат, маҳлули буфериро дар бар гирад (РН реаксияи оптималии фермент).Ко-субстратҳо ба монанди гидроксиламин бояд дар системаи реаксияи интиқоли ацил мавҷуд бошанд.
➢ AMD бояд охирин ба системаи реаксия бо рН ва ҳарорати оптималии реаксия илова карда шавад.
➢ Ҳама намудҳои AMD дорои шароити гуногуни реаксияи оптималӣ мебошанд, аз ин рӯ ҳар яки онҳо бояд дар алоҳидагӣ омӯхта шаванд.
Мисол 1(1):
Фаъолияти гидролиз ба субстратҳои гуногуни амид
Субстрат | Фаъолияти мушаххас мкмоль мин-1mg-1 | Субстрат | Фаъолияти мушаххас мкмоль мин-1mg-1 |
Ацетамид | 3.8 | ο- Ох бензамид | 1.4 |
Пропионамид | 3.9 | p- Ох бензамид | 1.2 |
Лактамид | 12.8 | ο-НХ2бензамид | 1.0 |
Бутирамид | 11.9 | p-НХ2бензамид | 0,8 |
Изобутирамид | 26.2 | ο-Толуамид | 0.3 |
Пентанамид | 22.0 | p-Толуамид | 8.1 |
Гексанамид | 6.4 | Никотинамид | 1.7 |
Циклогексанамид | 19.5 | Изоникотинамид | 1.8 |
Акриламид | 10.2 | Пиколинамид | 2.1 |
Метакриламид | 3.5 | 3-фенилпропионамид | 7.6 |
Пролинамид | 3.4 | Индол-3-ацетамид | 1.9 |
Бензамид | 6.8 |
Реаксия дар маҳлули буферии 50 мм фосфати натрий, pH 7,5, дар 70 ℃ гузаронида шуд.
Амидҳо | Гидроксиламин | Гидразин |
Ацетамид | 8.4 | 1.4 |
Пропионамид | 18.4 | 3.0 |
Изобутирамид | 25.0 | 22.7 |
Бензамид | 9.2 | 6.1 |
Реаксия дар маҳлули буферии 50 мм фосфати натрий, pH 7,5, дар 70 ℃ гузаронида шуд.
Консентратсияи реагентҳои алоқаманд: амидҳо, 100 мм (бензамид, 10 мМ);гидроксиламин ва гидразин, 400 мМ;фермент 0,9 мкм.
Мисол 2(2):
Мисол 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al.Экстремофилҳо, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al.Раванди биохимия, 2015, 50 (8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al.Химияи биоорганикӣ, 2017, онлайн дастрас 7.